Addasiad Ffosfforyleiddiad
Gall ymchwil ar broteinau a pheptidau ffosfforyleiddio helpu pobl i egluro mecanwaith y broses uchod a deall natur gweithgareddau bywyd ymhellach. Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, gyda datblygiad parhaus technoleg proteomeg, mae astudiaeth ffosfforyleiddiad protein wedi cael sylw mwy a mwy eang. Mae llawer o docsinau a phathogenau naturiol hefyd yn cael eu heffeithiau trwy newid statws ffosfforyleiddiad proteinau mewngellol.
Mae polypeptidau ffosfforylaidd yn cyfeirio'n bennaf at y Ser, Tyr a Thr Mae'r grŵp hydroxyl cadwyn ochr o'r gweddillion yn cael ei addasu i mewn i polypeptid ffosffad asid. Hyd yn hyn, mae addasu ffosfforyleiddiad polypeptidau yn ymwneud yn bennaf â dull ffosfforyleiddiad post- a Dau ddull synthesis:
Pan gaiff ei addasu gan y dull monomer, mae'n anodd cyddwyso'r asid amino ffosfforylated â'r gadwyn peptid oherwydd y rhwystr sterig a achosir gan y grŵp addasu cadwyn ochr mwy, a bydd cyflwyniad asid amino dilynol yn fwy anodd. Yn enwedig pan fydd yn cynnwys addasiadau safle ffosfforyleiddiad lluosog, bydd y synthesis yn dod yn hynod o anodd, ac mae gan y cynnyrch terfynol gydrannau cymhleth, mae'n anodd ei wahanu, ac mae ganddo gynnyrch isel iawn. Felly, pan fydd safleoedd lluosog yn y gadwyn peptid yn cael eu ffosfforyleiddio, gellir ystyried y dull postfforyleiddiad. Y brif broses synthesis yw tynnu'n ddetholus y gadwyn ochr sy'n amddiffyn grwpiau o'r asidau amino i'w labelu ar ôl cwblhau'r synthesis polypeptide. Ar gyfer Tyr, gellir defnyddio asidau amino Thr gyda chadwyni ochr heb eu diogelu yn uniongyrchol ar gyfer yr adwaith. Grŵp gwarchod cadwyn ochr ar 1% TFA / DCM Gellir ei dynnu'n feintiol o dan amodau penodol. Yn ystod y post-ffosfforyleiddiad, gellir defnyddio bis benzyl phosphoramidite. Mae'r tetrazole yn cynhyrchu'r ffosfforamidite tetrazole canolradd gweithredol, sydd wedi'i gysylltu â'r grŵp hydrocsyl, ac yna'n cael ei ocsidio o dan amodau peroxyacid i gynhyrchu grŵp ffosfforyl i gwblhau'r adwaith.
- Rydym yn darparu pSer, pTyr, pThr a D-pSer, D-pTyr, D-pThr gwasanaethau addasu Ffosfforyleiddiad.
- Gellir gwneud addasiadau ffosfforyleiddiad o 2 safle, 3 safle, 4 safle, a 5 safle ar yr un pryd.
Peptidau ffosfforyleiddiedig cassynthetig (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) aros)
1. Mae yna 4 safle ffosfforyleiddiad yn y dilyniant (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), Y purdeb yw 95% ac mae'r cylch cwblhau yn 3 wythnos.
